尿沉渣分析仪配套试剂

摘要】  目的 研制可适用于Sysmex UF-50尿沉渣分析仪配套试剂。方法 自制UF-50配套试剂,利用荧光染色原理对尿液中的有形成分进行染色,通过仪器的分析单元对有形成分进行分析和计数。结果 自制试剂与原厂试剂对质控液进行的测试结果相近,CV值均小于10%。结论 自制的UF-50配套试剂可以取代原厂的试剂,可以达到节省试剂成本的目的 
【关键词】  尿沉渣分析仪;尿液;配套试剂
    [Abstract]  Objective  To develop an applicable supplementary reagent to be used on Sysmex UF-50 urinary sediment analyzer.Methods  Development of a dedicated supplementary reagent for UF-50 by using fluorescence staining principle to stain the formed elements in urine was performed.With this reagent and the analyzing unit of the instrument,the formed elements can thus be analyzed and counted.Results  By using quality control reagent,test results obtained from the comparison between self-developed reagent and the reagent provided by UF-50 manufacturer were  so similar that its CV value was less than 10%.Conclusion  In order to be cost-effective,self-developed reagent can be used to replace the reagent provided by UF-50 manufacturer.
    [Key words]  urinary sediment analyzer;urine;supplementary reagent
    现今Sysmex(日本东亚)尿沉渣分析仪配套试剂一般为原厂提供或由国内生产企业采用进口试剂分装,故试剂成本较高且供货周期较长。部分国产试剂虽然价格相对便宜,但一般稳定性较差,以上原因制约了医院检验科尿常规检测尿沉渣计数分析项目的开展[1,2]。针对以上问题,我们对相关尿沉渣分析仪配套试剂进行了研发,通过检测证明我公司研发的相关试剂性能及稳定性均较好,在保证测试效果的同时降低了尿沉渣计数的配套试剂使用成本,为配合国内广大临床医院检验科尿沉渣计数分析项目向自动化方向发展起到了一定的促进作用。
    1  材料与方法
    1.1  材料
    1.1.1  仪器  Sysmex UF-50尿沉渣分析仪,冰点渗透压计(上海医大仪器厂),3250型电导率仪(上海任氏电子有限公司),pHS-3E型pH计上海雷磁仪器厂)。
    1.1.2  试剂  (1)自制试剂尿稀释液:氯化钠4 g/L,4-羟乙基哌嗪乙磺酸11 g/L,氢氧化钠0.5 g/L,EDTA(2K)4 g/L。尿染液:菲啶染料0.14 g/100 ml、羰花青染料0.04 g/100 ml、乙二醇100 ml。尿鞘液:氯化钠7.1 g/L、三羟甲基氨基甲烷缓冲液 2.0 g/L、乙二胺四乙酸二钾0.2 g/L、聚氧乙烯非离子表面活性剂0.8 g/L。将配好的尿稀释液、尿染液、尿鞘液分别用0.1 μm滤芯过滤器加以过滤。(2)对比试剂:Sysmex原厂试剂CELL SHEATH(鞘液),批号:G7083;URINOCATCH DILUENT(尿稀释液),批号:ZR8001;URINOSERCH(尿染液),批号:UR8001。
    1.1.3  测试标本  UF CHECK(尿质控),批号:A8002。
    1.2  方法
    1.2.1  试剂理化参数的比较  使用冰点渗透压计、电导率仪、pH计分别测定原厂和自配试剂的渗透压、电导率和pH值。
    1.2.2  对照试验  (1)按UF-50尿沉渣分析仪操作说明书进行操作,首先采用为原厂全套试剂,并执行灌注程序,保证管路已经灌满原厂试剂,把原厂质控液上下颠倒摇匀后滴于试管中,并再次摇匀试管中的质控液后立即进行测试,重复20次,计算平均值(x)和偏差值(CV%)。(2)将原厂试剂排空,待出现报警时换接上自配试剂,并执行灌注程序,保证管路已经灌满自配试剂,把原厂质控液上下颠倒摇匀后滴于试管中,并再次摇匀试管中的质控液后立即进行测试,重复20次,计算平均值(x)和偏差值(CV%)。
    2  结果
    2.1  两种试剂主要理化参数的比较  见表1。
    2.2  对照试验
    2.2.1  原厂试剂与自配试剂对照试验质控标本数据结果  见表2。
    2.2.2  原厂试剂与自配试剂对照试验质控标本散点图  见图1、2。表1  理化参数的比较表2  质控标本数据
  3  讨论
  UF-50尿沉渣分析仪是采用流式细胞荧光散射强度和电阻抗变化的原理来对尿液中的有形成分进行综合检测。仪器自动吸取定量的尿液后加以混合和稀释,然后用氮杂菲和羰花青对尿中的细胞、管型、细菌等有形成分进行染色,通过加压使细胞进入充满鞘液的液流室,在鞘液的作用下,细胞排成单列,经液流室的喷嘴喷出,形成的细胞柱与氩激光束垂直相交,使细胞产生荧光和光散射。光散射强度主要取决于细胞颗粒的大小,荧光强度与每种颗粒吸附的荧光染料量有关。不同的染色颗粒可产生不同的光散射强度和荧光强度。被染色的颗粒散射光和荧光越强,对应前向光脉冲信号越强,这是定性和定量分析的基础。分析仪还配备了电阻抗变化检测系统,在流动池的前、后方各装有两个电极并维持恒定的电流,当尿液样品通过仪器的液流室小孔时,随着不同颗粒和物质电阻抗的变化,两个电极之间的电压有相应的变化。UF-50全自动尿沉渣分析仪可以对红细胞、白细胞、管型、细菌、结晶、上皮细胞等尿有形成分提供定量分析报告及散点图,对于每一标本检测步骤模式一致,不受主观因素影响,易于质量控制和标准化,是一种高效率、高精度的可用于临床治疗监控的尿沉渣过筛检测仪器。但由于尿沉渣分析仪存在不能具体辨认细胞形态及病理管型的类型的缺陷,故通常在临床上只作为尿常规的筛查检测。对其检测的阳性标本,检验人员应本着对患者负责的态度,在显微镜下再行复检,为临床的诊断、疗效的观察提供确定的证据[3~5]。 表1中Sysmex原厂试剂与自配试剂的pH值、渗透压、电导率数值相当,误差均不超过10%,说明试剂浓度相当,配方效果接近。表2为原厂试剂与自配试剂对照试验质控标本数据结果,其红细胞、白细胞、管型、细菌、结晶、上皮细胞、电导率数据均较接近,CV值均小于10%。从图1、图2可以看出被测标本质控荧光强度(Fl)、前向荧光脉冲宽度(Flw)、前向散射光强度(Fsc)、前向散射光脉冲宽度(Fscw)、电阻抗信号综合分析的红细胞、白细胞及颗粒等的散射图分布位置接近。自配试剂经过在国内相关医院的长期试用,并与进口原装Sysmex尿沉渣分析仪试剂和国内的同类型其他厂家试剂进行对比试验,证明我公司自配的尿沉渣分析仪配套试剂在标本测试结果的准确性和稳定性方面均与进口试剂相近,并优于国内一般同类型尿沉渣分析仪试剂,故也可以替代现有国产或进口的同类型试剂。